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重组人ZNF278促进胃癌细胞系SGC7901增殖的研究

Cell proliferation was accelerated in gastric cancer cell line SGC7901 by transfecting the recombinant pcDNA3.1 (+)-ZNF278 expression plasmid

摘要:

目的:构建pcDNA3.1-ZNF278重组人真核表达质粒,研究ZNF278对胃癌细胞增殖和周期的影响.方法:PCR扩增正常人胃黏膜组织中的ZNF278基因,并用EcoR Ⅰ和Hind Ⅲ双酶切,与酶切后的pcDNA3.1-myc-his载体连接,转化DH5α大肠杆菌,克隆筛选,提取重组质粒,酶切鉴定并测序.重组人ZNF278真核表达质粒转染胃癌细胞系SGC7901,定量PCR和Western blot技术检测ZNF278表达状况,利用MTT和细胞记数法检测细胞增殖,同时分析细胞周期变化.结果:测序证实pcDNA3.1-ZNF278真核表达质粒构建成功,并成功转染SGC7901细胞,检测确认ZNF278表达上调,转染重组pcDNA3.1-ZNF278质粒的SGC7901细胞较对照组生长加快,促进细胞周期进入S期.结论:pcDNA3.1-ZNF278重组质粒构建成功,并可促进胃癌细胞系SGC7901细胞增殖和细胞进入分裂期.

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