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Smad4基因对胰腺癌细胞E-cadherin、β-catenin表达及增殖的影响

Effect of Gene Smad4 Transfection on Expression of E-cadherin and β-catenin and Proliferation in Human Pancreatic Cancer Cells

摘要:

目的 探讨Smad4基因对人胰腺癌细胞BxPC3 E-cadherin、β-catenin表达及细胞增殖的影响,为试图运用Smad4对胰腺癌进行基因治疗提供实验依据.方法 经脂质体介导将含有Smad4重组表达质粒转染人胰腺癌细胞BxPC3,用G418筛选及RT-PCR、Western blot鉴定;分别采用RT-PCR和Western blot检测转染阳性细胞克隆E-cadherin、β-catenin表达改变;又分别采用噻唑盐(MTT)比色法及5-溴-2-脱氧尿苷(BrdU)掺入法检测阳性细胞克隆的增殖活性.结果 成功建立表达Smad4的阳性BxPC3克隆(S4-8,S4-23),并证实其E-cadherin、β-catenin mRNA及蛋白表达均明显升高.MTT法和BrdU掺入法显示,S4-8与S4-23细胞克隆增殖显著降低.结论 Smad4可增加胰腺癌细胞E-cadherin及β-catenin的表达并抑制其增殖,Smad4可能对胰腺癌具有基因治疗的效果.

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