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食管癌细胞系中Nanog基因沉默对顺铂敏感性的影响

The Effect of Silencing Nanog Gene Expression on Sensitization to Cisplatin in Esophageal Cancer Cell-Line

摘要:

目的:检测干细胞基因Nanog在食管癌细胞系TE-1中的表达及其对顺铂敏感性的影响.方法:通过细胞免疫荧光检测食管癌细胞系TE-1中Nanog蛋白的表达;应用Lipofectamine 2000将荧光染料标记的Nanog siRNA转染进细胞中,通过荧光显微镜观察转染效率,再通过逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot检测小干扰RNA (siRNA)的沉默效率;转染后24 h加入顺铂,继续孵育48 h后测得不同转染组的半数抑制浓度(IC50),后加入相同浓度的顺铂5 mg/L,48 h后测得不同转染组的生存率.结果:Nanog蛋白在食管癌细胞系TE-1中高表达,以核表达为主;Nanog siRNA细胞转染率为(67.57±16.90)%,沉默效率可高达85%以上;转染24 h后加入顺铂,继续孵育48 h后测得Nanog siRNA组的IC50较阴性对照组和空白组相比均降低,差异有统计学意义.加入相同浓度顺铂5 mg/L,48 h后测得Nanog siRNA组细胞生存率明显低于阴性对照组和空白对照组,差异有统计学意义.结论:Nanog在食管癌细胞系TE-1中高表达,降低Nanog的表达后能够提高食管癌细胞对顺铂的敏感性.

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作者: 石磊芝 [1] 杜亚明 [1] 苏鹏 [2] 刘长军 [3] 王中彬 [1]
作者单位: 121000,辽宁医学院附属第一医院 [1] 辽宁省辽阳市中心医院胸外科 [2] 辽宁省鞍山第二医院 [3]
期刊: 《天津医药》2012年40卷4期 312-315,417页 MEDLINEISTICPKU
分类号: R735.1
栏目名称: 论著
DOI: 10.3969/j.issn.0253-9896.2012.04.003
发布时间: 2012-08-16
基金项目:
辽宁省科学技术计划项目 辽宁医学院青年科技启动基金
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