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垂盆草提取物对TGF-β1诱导的肾小管上皮细胞-肌成纤维细胞转分化和基质累积的影响

Effect of Sedum sarmentosum Bunge Extract on TGF-β1-induced renal epithelial-to-mesenchymal transi-tion and matrix accumulation

摘要:

目的:探讨垂盆草提取物(SSBE)对转化生长因子(TGF-β1)诱导的肾小管上皮细胞-肌成纤维细胞转分化(EMT)和基质累积的影响。方法:将体外培养的大鼠肾小管上皮细胞系(NRK-52E)细胞分为只加入溶剂的对照组,只加入TGF-β1(浓度为5μg/L)的诱导组,以及加入SSBE(浓度为10和100 mg/L)和TGF-β1(浓度为5μg/L)的干预组。细胞形态变化采用倒置相差显微镜观察;细胞免疫荧光染色检测III型胶原、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和钙黏蛋白(E-cadherin)的表达;反转录聚合酶链反应检测α-SMA、骨形成蛋白-7(BMP-7)、紧密连接蛋白(Tjp1)、I型胶原(Col1a1)、III型胶原(Col3a1)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和抑制因子-2(TIMP-2)mRNA的表达。结果:TGF-β1作用后,NRK-52E细胞形态发生变化,形成了长梭状的肌成纤维细胞(MFs);其上皮标志物E-cadherin和Tjp1的表达水平显著下降,而MFs标志物α-SMA表达显著增加;基质成分Col1a1和Col3a1的表达也明显增高。应用10和100 mg/L的SSBE干预后,抑制了TGF-β1诱导的细胞形态改变和α-SMA、Col1a1和Col3a1的高表达,并促进E-cadherin和Tjp1的表达。另外, SSBE也提高了BMP-7表达水平和MMP-2/TIMP-2比值。结论:SSBE可抑制TGF-β1诱导的肾小管上皮细胞纤维化样改变,而这一作用与其能有效阻止EMT进程和基质累积有关。

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