阳离子脂质体介导rhBMP-2基因转染兔骨髓基质干细胞体外分化成骨活性的实验
Osteoinductivity of recombinant human bone morphogenic protein-2 gene transfer mediated with cationic liposome for the differentiation of rabbit bone marrow mesenchymal stem cells in vitro
目的:探讨阳离子脂质体介导的重组人骨形态发生蛋白(Adv-rhBMP-2)基因对兔骨髓基质干细胞(marrow mesenchymal stem cells,MMSCs)体外成骨活性的影响.方法:2002-05/07在解放军总医院骨科研究所完成.脂质体介导的基因转染和检测方法:pEGFP-rhBMP-2的扩增、浓度及纯度鉴定.①脂质体包裹质粒DNA,转染MMSCs后测定转染率.②检测rhBMP-2,碱性磷酸酶(ALP)和Ⅰ型胶原的表达.结果:脂质体介导的基因转染后的检测结果:①脂质体介导pEGFP-rhBMP-2转染MMSCs后所测定的最大转染率为14 18%.②pEGFP-rhBMP-2转染的MMSCs中rhBMP-2,ALP和Ⅰ型胶原的表达呈阳性,而pEGFP转染的细胞和未染细胞rhBMP-2,ALP和Ⅰ型胶原的表达弱阳性.结论:①MMSCs是一种较理想的骨组织工程种子细胞.②脂质体介导质粒rhBMP-2的基因转移安全性好,但转染率相对较低,随着新一代高转染率脂质体的问世,这种治疗方法有望率先进入临床.
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