您的账号已在其他设备登录,您当前账号已强迫下线,
如非您本人操作,建议您在会员中心进行密码修改

确定

人单核细胞趋化因子-1基因重组卡介苗的构建与鉴定

摘要:

目的 构建能自动分泌性表达单核细胞趋化因子-1(MCP-1)的重组卡介苗.方法 分别以卡介苗(BCG)和人MCP-1cDNA为模板,通过PCR扩增得到120 bp的BCG Ag85B信号肽基因序列和300 bp的MCP-1基因序列.将上述两片段基因序列插入大肠杆菌-卡介苗穿梭质粒pMV261,得到重组质粒pMV261-Ag85B-MCP-1.测序鉴定完毕后,用电穿孔法将该重组质粒导入BCG中,构建重组卡介苗rBCG MCP-1.分别应用PCR扩增和Western blot检测rBCG MCP-1中MCP-1的基因和蛋白的表达.结果 质粒pMV261-Ag85B MCP-1用双酶切和PCR扩增及测序鉴定证实克隆基因BCGAg85B信号肽和MCP-1正确插入载体pMV261.Western blot显示rBCG MCP-1的培养上清和菌体中均可检测到MCP-1蛋白的表达.ELISA法可检测到培养上清中有高表达的MCP-1蛋白(340 pg/mL).结论 成功构建了能分泌MCP-1的新型重组卡介苗rBCG MCP-1,为进一步研究其抗膀胱肿瘤的疗效打下了基础.

更多
  • 浏览:57
  • 下载:2

加载中!

相似文献

  • 中文期刊
  • 外文期刊
  • 学位论文
  • 会议论文

加载中!

加载中!

加载中!

加载中!