融合型自杀基因系统Fcy∷Fur/5-FC对人肝癌细胞株HepG2体外杀伤作用的初步研究
A preliminary study of the role of fusion suicide gene system Fcy∷Fur/5-fluorocytosine in killing human hepatoma cell line HepG2 in vitro
摘要目的 研究融合型自杀基因Fcy∷Fur联合5-氟胞嘧啶(5-FC)对人肝癌细胞株HepG2的杀伤作用.方法 应用脂质体介导法将 Fcy∷Fur基因转染入人肝癌细胞株HepG2,经G418筛选2周后行有限稀释法获得稳定表达Fcy∷Fur基因的单克隆细胞.5-FC处理后,通过MTT法和Annexin V-FITC + PI双标记染色法,检测Fcy∷Fur/5-FC自杀基因系统对人肝癌细胞株HepG2的细胞增殖及凋亡的影响.结果 MTT法检测显示稳定表达Fcy∷Fur基因的HepG2单克隆细胞经5-FC处理后,在1、2、3、4、5天时对细胞的增殖有明显抑制作用.Annexin V-FITC + PI双标记染色法检测细胞凋亡率:1天为5.74 %,2天为11.04%,3天为17.56%;PBS处理的细胞凋亡率:1天为3.67%,2天 为3.68%,3天为4.42%,凋亡率无明显改变.结论 Fcy∷Fur/5-FC自杀基因系统对人肝癌细胞株HepG2的增殖有明显的抑制作用,并可促进肿瘤细胞凋亡.
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