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ARHI基因转染PANC1细胞后对细胞凋亡和自噬相关基因表达谱的影响

Effect of ARHI transfection on apoptosis and autophagy related gene expression profile of PANC1 cells

摘要:

目的 观察ARHI基因转染PANC1细胞后对细胞凋亡和自噬相关基因mRNA表达谱的影响.方法 采用脂质体法将表达ARHI基因的质粒pIRES2-EGFP-ARHI、空质粒pIRES2-EGFP转染胰腺癌PANC1细胞.采用基因芯片RT2ProfilerTM PCR Array行实时定量PCR,分析转染细胞的基因表达谱,包括84个与凋亡和自噬相关基因.结果 ARHI基因转染组PANC1细胞有9个基因mRNA表达下调,38个基因mRNA表达上调,37个基因mRNA表达变化无意义.在与凋亡相关的基因中有8个促凋亡基因表达显著上调(>6倍),主要为TNFR/TRFSR家族基因(TNFSF8、TNFRSF10B、TNFRSF11B、TNFRSF9)、CIDE家族基因(DFFA)、CASP家族基因(CASP10、CASP8)和死亡结构域家族基因(DAPK1),其中以DAPK1上调尤为明显,达42.83倍;抗凋亡基因中3个基因(CD27、BCL2L10、BIRC4)表达显著上调(>6倍),3个基因(BCL2、BAD、BAG4)表达轻度上调(>2倍),1个基因(BCL2L1)表达轻度下调(<-2倍).在与自噬相关的基因中3个促自噬基因(TNFRSF10B、DAPK1、CASP10)表达显著上调(>6倍),4个基因(TNFRSF10A、FADD、TP53、TP53 BP2)表达轻度上调(>2倍);3个抑制自噬基因(BCL2、CASP8、FAS)表达轻度上调(>2倍),1个基因(MCL1)表达轻度下调(<-2倍).结论 ARHI基因显著上调细胞凋亡及自噬重要调控基因Caspase-8和DAPK1.

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