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eNOS解偶联对大脑中动脉栓塞后大鼠神经血管单元的作用及机制

Effects and mechanism of eNOS uncoupling on the neurovascular unit in rats with middle cerebral artery occlusion

摘要:

目的 探讨大鼠大脑中动脉栓塞模型中,内皮型一氧化氮合酶(eNOS)解偶联对神经血管单元的作用及机制.方法 将80只雄性SD大鼠随机分为假手术组(n=40)和大脑中动脉栓塞(MCAO)组(n=40).参照Longa法制作MCAO模型.栓塞后6 h,通过蛋白印记法检测缺血区eNOS不同偶联状态的表达情况及3-硝基酪氨酸(3-NT)的水平;通过尼氏染色比较缺血区神经元的形态及存活情况;通过免疫组织化学染色比较缺血区星形胶质细胞、微血管内皮细胞以及血脑屏障紧密连接对应的标记物GFAP、VWF、Occludin的表达水平;通过MRI的T2加权序列和动脉自旋标记(ASL)反应栓塞后脑组织病灶范围及血流情况.结果 MCAO后栓塞部位在T2序列上呈高信号,在ASL序列上血流信号减低.eNOS二聚体/单体的比例明显低于假手术组(P<0.05);3-NT的含量明显高于假手术组(P<0.05).尼氏染色显示MCAO后神经元大量空泡形成,核固缩变性,数量显著减少;免疫组化结果显示,VWF、Occludin的表达较假手术组明显减少,而GFAP则明显增多(P<0.05).结论 MCAO会导致eNOS解偶联.eNOS解偶联后NO合成受限,而具有毒性作用的3-NT产生增多,炎症反应加重,从而对神经血管单元结构及功能产生破坏作用.

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