从PBMCs及CD133免疫磁珠分选获得内皮祖细胞的体外研究
Comparative analysis of cultured endothelial progenitor cells in vitro from PBMCs and enriched CD133~+ cells
目的:比较从外周血单个核细胞(PBMCs)和CD133免疫磁珠分选体外培养人外周血内皮祖细胞(EPCs)的表型、分化、扩增、功能特点,为EPCs细胞治疗提供临床参考.方法:健康成年人外周血,经Ficoll密度梯度离心法得PBMCs,经直接接种法或免疫磁珠分选CD133阳性细胞后置于M199培养基中培养,于第7、14 d比较2组细胞表型变化及细胞因子分泌、扩增、体外血管形成及趋化能力.结果:相同血量标本PBMCs组早期集落数高于CD133~+组(P<0.01),随着培养时间的推移,流式细胞检测2组细胞均显示造血干细胞标志的表达下调和内皮细胞标志表达上升,但CD133~+组内皮标志CD144表达率低于PBMCs组(P<0.01),ELISA法检测到在PBMCs组早期EPCs分泌VEGF的水平高于CD133~+组(P<0.01),MTT法显示PBMCs组有较强的增殖能力,基质胶及Transwell实验表明PBMCs组细胞参与血管形成的能力较强.结论:CD133~+来源的EPCs分化、分泌、增殖及血管形成能力相对较低,推断PBMCs中CD133~-细胞可能在形成功能性的EPCs中发挥更重要的作用.
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