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siRNA对预分化骨髓间充质干细胞β2M表达的影响

Effect of small interfering RNA on expression ofβ2 M in pre-differentiated bone marrow mesenchymal stem cells

摘要:

目的:研究小干扰RNA(siRNA)对预分化骨髓间充质干细胞(BMSCs)β2-微球蛋白(β2M)基因表达的影响。方法:BMSCs成软骨诱导液预分化21 d后,将β2 M siRNA用Lipofectamine 2000转染BMSCs、分为转染组、空白对照组和阴性对照组,应用实时定量PCR、Western blotting、激光共聚焦显微观察等方法检测siRNA对预分化BMSCs的β2 M mRNA和蛋白的表达情况,甲苯胺蓝和Ⅱ型胶原免疫荧光检测预分化BMSC的蛋白聚糖多聚体和Ⅱ型胶原分泌情况。结果:实时定量PCR、Western blotting 和激光共聚焦显微观察结果显示siRNA成功抑制β2 M mRNA和蛋白的表达,甲苯胺蓝和Ⅱ型胶原免疫荧光结果显示siRNA不影响预分化BMSCs蛋白聚糖多聚体和Ⅱ型胶原蛋白的分泌。结论: RNAi 干扰β2 M 可降低BMSCs 中β2 M mRNA和蛋白的表达,但不影响预分化BMSCs的软骨细胞特性。

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作者: 戴兵 [1] 范时洋 [1] 陈龙 [1] 金海东 [1] 蔡建武 [1] 潘骏 [1]
期刊: 《中国病理生理杂志》2014年8期 1410-1414页 ISTICPKUCSCD
分类号: R392
栏目名称: 论著
DOI: 10.3969/j.issn.1000-4718.2014.08.013
发布时间: 2014-09-30
基金项目:
浙江省自然科学基金资助项目(No.Y2100899) 浙江省科技厅基金资助项目(No.2009C33131) 温州市科技局基金资助项目
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