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TGFβ1/Smad3信号通路介导的赖氨酸羟化酶2活性变化在肺纤维化胶原沉积中的作用

Role of TGFβ1/Smad3 signaling pathway-mediated lysine hydroxylase 2 activity in collagen deposition of pulmonary fibrosis

摘要:

目的:探讨TGFβ1/Smad3信号通路对赖氨酸羟化酶2(lysyl hydroxylase 2,LH2)活性变化的影响,以及这一变化在肺纤维化胶原沉积中的作用及机制.方法:用含10%胎牛血清的F12培养基培养人肺成纤维细胞株HFL1.实验分为对照组、TGFβ1(10 μg/L)刺激组和米诺地尔(5μmol/L)干预组,对照组加等量培养基;48 h后收集各组RNA及蛋白,采用RT-qPCR检测PLOD2、α-SMA及COL Ⅰ的mRNA表达水平,Western blot检测LH2、总Smad3、磷酸化Smad3、α-SMA、COLⅠ和COLⅣ的蛋白水平变化,ELISA检测细胞中羟基赖氨酰吡啶酚(hydroxylysylpyridinoline,HP)的含量变化.结果:TGFβ1刺激后,PLOD2、α-SMA及COL Ⅰ的mRNA表达上调(P<0.01);其对应的蛋白水平如LH2、磷酸化Smad3、α-SMA、COL Ⅰ和COLⅣ蛋白水平增高,而总Smad3的蛋白水平没有变化.米诺地尔干预后上述基因的mRNA及蛋白表达减少(P<0.01).TGFβ1刺激后ELISA检测到HP含量较对照组增加,米诺地尔干预后合成减少(P<0.05).结论:TGFβ1/Samd3信号通路激活,使LH2表达增多;而米诺地尔通过抑制TGFβ1/Samd3信号转导,减少LH2的表达,减少羟基化胶原吡啶链的合成,从而减轻肺纤维化病变.

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作者: 邵松军 [1] 方海燕 [2] 叶贤伟 [1] 饶姗姗 [1] 张帮艳 [1] 袁国航 [1] 刘维佳 [1] 张湘燕 [1]
期刊: 《中国病理生理杂志》2019年35卷10期 1858-1863页 ISTICPKUCSCD
分类号: R563.19R363.2
栏目名称: 论著
DOI: 10.3969/j.issn.1000-4718.2019.10.019
发布时间: 2020-01-13
基金项目:
国家自然科学基金资助项目 贵阳市科技计划项目 贵州省卫计委科学基金资助项目
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