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Slfn1通过下调Cyclin D1抑制内皮祖细胞的黏附功能

Slfn1 Reduces the Adhension of Endothelial Progenitor Cells by Decreasing CyclinD1

摘要:

目的 探讨睡眠因子1(Slfn1)对内皮祖细胞(EPC)黏附功能的影响.方法 实验分为空白对照组(未给予任何处理的EPC,N-control组)、腺病毒阴性对照组(Ad-control组)、Slfn1腺病毒载体组(Ad-Slfn1组)、发夹状RNA阴性对照组(ShRNA-control组)、发夹状RNA Slfn1干扰组(ShRNA-Slfn1组).分离培养大鼠骨髓源性EPC,用ShRNA-control质粒、Ad-Slfn1及相应的对照质粒分别转染EPC,采用Western blot检测细胞Slfn1及Cyclin D1表达,将EPC接种在预先铺好纤维连接蛋白的培养板中,观察其黏附功能.用流式细胞仪检测细胞周期.结果 ShRNA-Slfn1组Slfn1蛋白的表达明显低于ShRNA-control组,Ad-Slfn1组Slfn1蛋白的表达明显高于Ad-control组,说明转染有效.用ShRNA-Slfn1减弱EPC Slfn1基因的表达明显增强EPC的黏附能力,过表达Slfn1基因则明显抑制EPC的黏附能力.细胞周期检查结果显示,降低EPC Slfn1基因的表达,EPC的细胞周期进入到S期细胞明显增多,过表达Slfn1基因使EPC的细胞周期停止在G1期.Western blot检测结果发现,ShRNA-Slfn1组Cyclin D1的蛋白表达明显高于ShRNA-control组,而Ad-Slfn1组Cyclin D1的蛋白表达则明显低于Ad-control组.结论 Slfn1通过下游靶点Cyclin D1负性调控EPC的黏附功能.

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