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实时定量PCR检测Nel样型分子基因对大鼠骨髓基质细胞成骨相关基因表达的影响

Effects of Nell-1 gene on bone formation-related gene expression during osteoblastic differentiation of rat bone marrow stromal cells by real-time PCR

摘要:

目的:研究Nel-like 1型分子(Nell-1)基因对体外培养大鼠骨髓基质细胞(bone marrow stromal cells,bMSCs)成骨相关基因表达的影响.方法:取6周龄雄性Fischer 344大鼠胫骨和股骨骨髓体外培养,以腺病毒为载体,进行基因转染,绘制生长曲线并测定转染效率.以转染β-半乳糖苷酶(β-Galactosidase,LacZ)基因的bMSCs为对照组,转染Nell-1的bMSCs为试验组,用实时定量PCR(real-time PCR)测定成骨相关基因碱性磷酸酶基因(alkaline phosphatase,ALP)、骨涎蛋白(bone sialoprotein,BSP)、骨钙素(osteocalcin,OC)、骨桥蛋白(osteopontin,OP)和Sox9的表达.以2-△△CT法计算基因表达的相对比值.结果:随着Nell-1基因转染滴度的增高,细胞增殖速度减慢.基因转染效率随滴度增加而增高.Nell-1基因转染大鼠bMSCs,早期下调、中期和晚期上调ALP的表达,晚期上调OC的表达,整个成骨周期中均上调OP和BSP的表达.结论:Nell-1基因可能通过影响各成骨相关基因的表达而促进大鼠bMSCs的成骨分化.

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作者: 胡镜宙 [1] 蒋欣泉 [1] 张志愿 [1] 李金忠 [1] 严明 [1]
分类号: R782.2.3
栏目名称: 基础研究|%Scientific Articles
DOI: 10.3969/j.issn.1672-3244.2008.01.009
发布时间: 2008-04-28
基金项目:
国家自然科学基金 上海市科委资助项目 上海市教委资助项目 上海市重点学科建设项目 上海市教委"曙光计划"
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