SARS-CoV S基因的克隆及其shRNA表达载体的构建
Cloning of SARS-CoV-S gene and construction of its short interfering RNAs expression vector
目的构建绿色荧光蛋白与SARS-CoV S基因的融合表达载体pEGFP-C1-S及针对SARS-CoV S基因的shRNA表达载体pshRNA-S,以观察shRNA对SARS-CoV S蛋白表达的影响.方法人工合成SARS-CoV S基因片段及其shRNA引物,两端设计酶切位点,分别与载体pEGFP-C1和pTZU6+1连接,转化大肠杆菌DH-5а和JM109,酶切及测序鉴定. 结果酶切电泳显示pEGFP-C1-S插入片段大小为1 416bp,测序结果显示pshRNA-S中插入的shRNA引物序列正确.结论成功构建融合表达载体pEGFP-C1-S 及针对SARS-CoV S基因的shRNA表达载体pshRNA-S.
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