换一批植物乳杆菌中胆盐水解酶基因的原核表达及纯化
Prokaryotic Expression of Bile Salt Hydrolase Gene of Lactobacillus plantarum and Purification of Expressed Product
摘要目的 克隆植物乳杆菌中胆盐水解酶(BSH)基因,原核表达并纯化重组蛋白.方法 利用PCR技术扩增植物乳杆菌BSH基因,克隆至表达载体pET-30a,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达,并对表达产物进行纯化及Western blot鉴定.结果 重组表达质粒pET-30a-BSH经双酶切鉴定,可见961 bp的目的 基因条带.表达的重组蛋白相对分子质量约为40 000(含6个His标签),主要以包涵体形式表达,表达量约占菌体总蛋白的43%,纯化后,纯度达90%以上,且可与植物乳杆菌多克隆抗血清发生特异性反应.结论 已成功克隆了植物乳杆菌中BSH基因,并在大肠杆菌中获得高效表达.纯化的重组蛋白纯度较高,为高效降解胆固醇的基因工程菌株的研究奠定了基础.
更多相关知识
栏目名称
发布时间
2009-11-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
- 浏览0
- 被引13
- 下载0
相似文献
- 中文期刊
- 外文期刊
- 学位论文
- 会议论文
