换一批
换一批酪氨酸激酶抑制剂对转染p15基因的K562细胞的作用
Effect of Tyrosine-kinase Inhibitor on p15 Gene Transfected K562 Cells
摘要：
本研究探讨酪氨酸激酶抑制剂伊马替尼(imatinib)和p15基因克隆联合作用对K562细胞的增殖、细胞周期及凋亡等的调控作用.用RT-PCR扩增p15基因,胶纯化回收后连接到T载体测序,确认序列正确后构建p15-pcDNA3.1载体,将p15-pcDNA3.1与空载体分别以脂质体转染入p15基因突变的K562细胞,经筛选得到G418抗性的K562细胞株;用Western blot检测转染后P15蛋白的表达;用MTT法测定细胞存活率;流式细胞术检测细胞周期和凋亡.结果表明:从对照K562细胞中扩增的DNA片段,在第174-180位点有7个碱基缺失,这证实对照K562细胞中p15基因部位基因缺失.表达外源性P15蛋白的p15-pcDNA3.1-K562细胞株生长速度明显慢于对照K562细胞株;流式细胞术显示G0/G1期细胞增多,S期细胞明显减少;p15-pcDNA3.1-K562细胞与伊马替尼联合应用后凋亡细胞比例明显上升,MTT法显示细胞存活率较对照细胞明显下降.结论:表达外源P15蛋白联合应用伊马替尼对抑制K562细胞增殖及促凋亡方面具有协同作用.
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作者：
作者单位：
解放军第一七五医院血液科,漳州,363000
[1]
第四军医大学西京医院血液科,西安,710032
[2]
第四军医大学西京医院生物化学和分子生物学教研室,西安,710032
[3]
期刊：
《中国实验血液学杂志》2007年15卷1期 42-46页
MEDLINEISTICPKUCSCD
栏目名称：
白血病--基础/临床
DOI：
10.3969/j.issn.1009-2137.2007.01.010
发布时间：
2007-04-04
基金项目：
国家自然科学基金
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