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SIRT1蛋白在胃癌中的表达及其与P-gp、Top-Ⅱα关系的研究

Expression of SIRT1 protein in gastric cancer and its relationship with P-gp and Top-Ⅱ alpha

摘要:

目的:探讨SIRT1蛋白在胃癌组织和细胞中的表达,分析SIRT1蛋白表达与耐药相关蛋白P-gp和Top-Ⅱα的相关性.方法:免疫组化SP法检测SIRT1、P-gp及Top-Ⅱα蛋白在15例胃癌组织和15例正常胃黏膜组织中的表达.Western blot检测正常人胃黏膜上皮细胞株GES-1和人胃癌细胞株SGC7901、MKN45、MKN28、HGC27、AGS、MGC803中SIRT1蛋白的表达;检测GES-1、SGC7901及MKN45中的SIRT1、P-gp和Top-Ⅱα的蛋白表达;siRNA-SIRT1/脂质体转染胃癌细胞SGC7901后,Western blot检测SIRT1、P-gp和Top-Ⅱα的蛋白表达变化;MTT-检测SGC7901细胞的体外增殖能力变化及对化疗药物5-Fu的敏感性变化.结果:15例胃癌组织中SIRT1蛋白表达阳性15例,P-gp蛋白表达阳性13例,Top-Ⅱα蛋白表达阳性3例;15例正常胃黏膜中SIRT1蛋白表达阳性6例,P-gp蛋白表达阳性5例,Top-Ⅱα蛋白表达阳性0例.GES-1、SGC7901、MKN45、MKN28、HGC27、AGS、MGC803中SIRT1相对蛋白表达量平均值分别为0.385、0.827、0.009、0.232、0.275、0.159、0.117;GES-1、SGC7901、MKN45中的P-gp相对蛋白表达量平均值分别为0.339、0.526、1.03;Top-Ⅱα的蛋白相对表达量分别为0.093、0.889、0.158. siRNA-SIRT1转染SGC7901 8 h,培养72 h后检测control、BC-V、negative、siRNA-1、siRNA-2、siRNA-3的SIRT1相对蛋白表达量平均值分别为0.965、0.937、0.958、0.567、0.253、0.083;P-gp相对蛋白表达量平均值分别为1.893、1.905、1.932、0.465、0.006、0.005;Top-Ⅱα的蛋白相对表达量分别为0.09、0.07、0.073、0.085、0.168、0.195.M-TT结果显示抑制SIRT1蛋白表达后,SGC7901体外增殖能力无明显变化,对化疗药物5-Fu的敏感性显著增加.结论:SIRT1在胃癌组织中过表达,且过表达的胃癌组织、细胞中SIRT1扮演促癌因子角色;SIRT1蛋白过表达能促进P-gp蛋白表达,降低Top-Ⅱα蛋白表达,导致胃癌细胞化疗多重耐药性的增加.

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