人HSC70基因真核表达载体的构建和表达-论文-万方医学网

人HSC70基因真核表达载体的构建和表达

Construction and expression of HSC70 gene eukaryotic exoression plasmid

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摘要：

目的构建HSC70(HSC)真核表达质粒,并在HepG2细胞中表达.方法采用KT-RCR方法从正常人肝细胞系QZE中得到HSC70的CDNA序列,然后,克隆入pcDNATM3.1/V5-HisA载体,构建重组质粒pcDNA-HSC70;经酶切和测序鉴定后,将pcDNA-HSC70体外转染HepG2细胞系,瞬时表达带有His标签的HSC70融合蛋白;并通过免疫细胞化学方法检测蛋白表达情况.结果 RT-PCR扩增到1960 bp的HSC70cDNA片断,经测序分析与GenBank中已知序列一致;重组质粒pcDNA-HSC70转染后的HepG2细胞中,可检测到瞬时表达的HSC70-His融合蛋白.结论成功构建重组质粒pcDNA-HSC70,并可以在真核细胞HepG2中瞬时表述.

作者：苏海霞 ^[1] 张景霞 ^[1] 王安辉 ^[1] 李端 ^[1] 闫永平 ^[1]

作者单位：第四军医大学,预防医学系流行病学教研室,陕西,西安,710032 ^[1]

期刊：《中国现代医学杂志》2008年18卷4期 398-401页 ISTICPKU

关键词： HSC70 肝细胞克隆真核表达

主题词：人(Persons)肝细胞(Hepatocytes)基因(Genes)质粒(Plasmids)方法(Methods)

分类号： R730.2

栏目名称：论著

DOI： 10.3969/j.issn.1005-8982.2008.04.004

发布时间： 2008-05-20

基金项目：

国家自然科学基金

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