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蟾酥活性成分协调索拉非尼通过下调Akt/NF-κB信号途径抑制肝癌HepG2细胞生长

Synergy with the active ingredients of toad venom and sorafenib suppresses hepatocellular carcinoma HepG2 cells proliferation through down-regulating Akt/NF-κB signaling pathways

摘要:

目的 探讨蟾酥活性成分蟾蜍灵和华蟾毒配基协调索拉非尼抑制肝癌HepG2细胞生长的机制.方法 MTT法检测HepG2细胞经药物作用12、24、48 h后的增殖活性;Hoechst 33342荧光染色检测细胞形态学变化;流式细胞仪检测药物对HepG2细胞周期的影响;Western blot检测Akt、p-Akt(Ser473)、IκB、NF-κB、p-NF-κB p65、Bcl-2、Bax、cyclin A、PC-NA蛋白表达水平.结果 蟾蜍灵、华蟾毒配基和索拉非尼作用组均能抑制HepG2细胞增殖,且药物联合作用组的增殖抑制率明显高于单独药物作用组,呈时间依赖性,用金氏公式得出在24 h具有协同作用(P<0.01);荧光染色结果显示,HepG2细胞经药物处理24 h后,细胞呈现出核染色质凝集的凋亡形态特征;细胞周期检测结果显示,索拉非尼作用组使细胞周期阻滞于G0/G1期(P<0.01),蟾蜍灵、华蟾毒配基作用组使细胞周期阻滞于S期(P<0.01),药物联合作用组使细胞周期阻滞于S期(P<0.01);Westem blot结果显示,蟾蜍灵、华蟾毒配基和索拉非尼单独药物作用组和联合作用组Akt、NF-κB总蛋白表达均无明显变化,p-Akt(Ser473)、p-NF-κB p65、Bcl-2、cyclin A、PCNA蛋白表达水平逐渐降低,联合作用组比单独药物作用组降低更为明显(P<0.01).IκB、Bax蛋白表达水平逐渐升高,联合作用组比单独药物作用组升高更加明显(P<0.01).结论 蟾酥活性成分蟾蜍灵和华蟾毒配基协调索拉非尼通过下调Akt/NF-κB信号通路,抑制肝癌HepG2细胞增殖.

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作者: 王志美 [1] 徐忠伟 [2] 王佳宝 [1] 代二庆 [3] 徐瑞成 [4]
作者单位: 锦州医科大学中国人民武装警察部队后勤学院附属医院研究生培养基地,天津,300162 [1] 中国人民武装警察部队后勤学院中心实验室,天津,300162 [2] 中国人民武装警察部队后勤学院附属医院军人医疗保健中心,天津,300162 [3] 中国人民武装警察部队后勤学院中心实验室,天津300162;天津市职业与环境危害生物标志物重点实验室,天津300309 [4]
期刊: 《中国药理学通报》2017年33卷11期 1510-1516页 ISTICPKUCSCDCABPEMBase
栏目名称: 论著
DOI: 10.3969/j.issn.1001-1978.2017.11.008
发布时间: 2017-12-08
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