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苹果多糖的制备及对脂多糖诱导RAW 264.7细胞凋亡的影响

Preparation of Apple Polysaccharides and Its Effects on Lipopolysaccharide-induced RAW 264.7 Apoptosis

摘要:

目的:观察苹果多糖(AP)对脂多糖(LPS)诱导RAW 264.7细胞凋亡的影响及其机制.方法:采用水提醇沉法从苹果果渣中提取苹果多糖,并测定其糖含量和分子量.采用流式细胞仪考察AP对LPS诱导RAW 264.7细胞凋亡的作用.采用Western Blot法考察AP对LPS诱导RAW 264.7细胞中Bcl-2、Bax蛋白表达的影响.结果:经水提醇沉法提取纯化得到苹果多糖的糖含量为91.3%,重均分子量为184613 Da.流式细胞仪检测结果显示,LPS诱导RAW 264.7细胞凋亡明显高于正常对照组(P<0.01);与LPS组比较,浓度为0.5 mg· ml-1的AP作用72 h后RAW 264.7细胞凋亡率显著降低(P<0.01),浓度为1.0mg·ml-1的AP作用48,72 h后RAW 264.7细胞凋亡率显著降低(P<0.01).Western Blot检测结果显示,与正常对照组比较,LPS诱导RAW 264.7细胞中的Bcl-2蛋白在48,72 h表达明显升高,差异具有统计学意义(P<0.01);与LPS组比较,浓度为1 mg·ml-1的AP作用后,升高了LPS诱导的RAW 264.7细胞Bcl-2蛋白的表达,降低其Bax蛋白的表达,差异具有统计学意义(P<0.01).结论:AP抑制LPS诱导RAW 264.7细胞凋亡,其机制可能是通过提高RAW 264.7细胞中Bcl-2蛋白的表达,降低其Bax蛋白表达.

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