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克隆筛选法体外纯化骨髓间充质干细胞

Purification of bone marrow mesenchymal stem cells by a Colony-Forming system

摘要:

目的 尝试使用简单的克隆筛选法来纯化骨髓间充质干细胞(Bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)并进行鉴定.方法 对早期分离培养的BMSCs,采取低密度接种(10/cm2),待有单克隆形成,用细胞刮除去其他细胞,将克隆的细胞以低密度接种,待再次有单克隆形成时可重复以上操作,反复进行筛选.对筛选的BMSCs生物学特性进行观察,FACs鉴定BMSCs的标记物的表达,并进行成脂、成骨诱导试验.结果 采用克隆筛选法培养BMSCs在传代筛选2~3代后即可获得形态均一的细胞群,FACs鉴定细胞高表达BMSCs的阳性标记物(CD29 98.8%,CD90 98.4%),低表达BMSCs的阴性标记物(CD31 2.6%,CD45 3%).BMSCs能被高效地诱导向脂肪和骨分化.结论本实验采用的克隆筛选法可在短期内获得高纯度的BMSCs,方法简单易行而效率高.

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