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反相高效液相色谱法测定大鼠脑组织吗啡-3-葡萄糖醛酸苷含量

DETERMINATION OF MORPHINE-3-GLUCURONIDE IN RAT BRAIN IN VITRO BY REVERSED-PHASE HIGH PERFORMANCE LIQUID CHROMATOGRAPHY

摘要:

目的:建立一种反相高效液相色谱(RP-HPLC)检测法,用于测定大鼠脑组织中吗啡-3-葡萄糖醛酸苷(M3G)的浓度.方法:微粒体酶体外反应体系,经孵育和处理后,采用HPLC分析定量,并进行方法学考察.RP-HPLC测定采用Diamonsil ~(TM)C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5 μm),流动相为10 mmol·L~(-1) 磷酸二氢钾缓冲液(含1 mmol·L~(-1)十二烷基磺酸钠,磷酸调pH=2.15):乙腈(79.5∶20.5),流速:1.5 ml·min~(-1),紫外检测波长:210 nm,进样量50 μl.结果:本实验条件下各物质分离良好,M3G线性范围50-600 μg· L~(-1). M3G最低检测限为50 μg· L~(-1).M3G的方法回收率在90%-105%范围内,提取回收率在75%以上.结论:本法可用于对大鼠脑微粒体体外孵育生成吗啡-3-葡萄糖醛酸苷含量的测定.

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