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肝细胞癌患者循环血肿瘤细胞的检测、分型鉴定及其临床意义

Detection and classification of circulating tumor cells in hepatocellular carcinoma patients and their clinical significance

摘要:

目的 通过对肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)患者外周循环血肿瘤细胞(circulating tumor cells,CTCs)的检测及亚型鉴定,分析其与HCC临床分期的关系及对手术预后的影响.方法 采用CanPatrolTM CTC-二代捕获技术联合RNA多重原位杂交分析(RNA in situ hybridisation,RNA-ISH),检测112例可手术切除HCC患者术前1~2 d与术后8~10 d外周循环血中的肿瘤细胞,并根据上皮-间叶转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)相关标志物的表达情况对其进行分型鉴定.同时,抽取20名健康志愿者的外周血作对照.结果 112例HCC患者术前1~2 d检测出CTCs101例(90.18%),20名健康志愿者的外周血中未检测到CTCs.根据EMT相关标志物的表达情况,将检测出的CTCs分为上皮型CTCs、上皮为主型CTCs、上皮/间叶混合型CTCs、间叶为主型CTCs及间叶型CTCs.其中CTC总数及间叶型CTC的比例与HCC的巴塞罗那肝癌临床(barcelona clinic liver cancer,BCLC),分期密切相关.当以CTC总数等于16作为临界点时,预测患者术后极早期复发的敏感性为55.3%,特异性为92.3%,曲线下面积(area under the curve,AUC)为0.74;当以间叶型CTC的比例等于2%作为临界点时,预测患者术后极早期复发的敏感性为80.9%,特异性为69.2%,AUC为0.748.CTC总数≥16且间叶型CTC的比例≥2%组的患者中位无瘤生存期为3.5个月,明显低于单纯CTC总数≥16或间叶型CTC的比例≥2%组(7个月)和CTC总数<16且间叶型CTC的比例<2%组(13.5个月),差异有统计学意义(P<0.05).112例HCC患者术后8~10 d CTC总数较术前有所下降,但间叶型CTC的比例较术前增多.术后出现间叶型CTC的比例增多的患者无瘤生存期短于间叶型CTC的比例下降(或不变)的患者,其预后也较差(P<0.05).对10例患者进行术后连续定期CTCs变化的动态监测直至复发,发现其中8例患者于出现临床可见复发病灶前的1~2个月,CTCs就可出现逐渐增多的趋势.结论 HCC患者外周血CTC阳性率高,CTCs能被检测出存在于早期HCC患者外周血中,提示HCC的播散转移是早期事件;术前高CTC总数或高间叶型CTC的比例以及术后出现间叶型CTC的比例增多的患者,其复发时限较短,预后较差.术后动态监测CTCs变化,对HCC极早期复发的预测具有一定的临床意义.

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