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一氧化氮合酶抑制剂治疗实验性自身免疫性心肌炎的研究

Study of L-NAME treatment on experimental autoimmune myocarditis

摘要:

目的:观察一氧化氮合酶(NOS)抑制剂NG硝基-L-精氨酸甲酯(L-NAME)对小鼠实验性自身免疫性心肌炎(EAM)的治疗效果并且探讨与凋亡相关的治疗机制.方法:30只Balb/C雄性小鼠,随机分成3组(n=10):正常对照组、模型对照组和实验组.模型对照组和实验组分别在第0天和第7天在小鼠双侧腹股沟和腋窝皮下给予猪心肌肌凝蛋白注射,腹腔注射百日咳毒素制作EAM模型,实验组于第1~21天给予L-NAME(5 mg/(kg·day))腹腔注射,模型对照组给予等剂量生理盐水.第21天眼球取血后断髓处死小鼠,计算心脏重量/体重(HW/BW); HE染色检测各组心肌炎症积分;原位末端缺口标记技术(TUNEL)检测各组心肌细胞凋亡指数;化学发光法检测各组血清一氧化氮(NO)的含量和分光光度法检测血清诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的活性;实时定量PCR检测心脏中半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶8和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶9(Caspase-3、Caspase-8和Caspase-9)和iNOS mRNA表达水平;免疫组织化学检测Caspase-3、Caspase-8和Caspase-9蛋白表达水平.结果:模型对照组的HW/BW、心肌炎症积分、NO含量、iNOS活性和mRNA表达、Caspase-3、Caspase-8和Caspase-9 mRNA和蛋白表达以及心肌细胞凋亡指数明显高于正常对照组(P<0.01);与模型对照组相比,实验组除HW/BW(P< 0.05)降低外,心肌炎症积分、血清NO含量、血清iNOS活性和心脏iNOS的mRNA表达、Caspase-3、Caspase-8和Caspase-9的mRNA和蛋白表达以及心肌细胞凋亡指数均显著降低(P<0.01).结论:EAM小鼠心肌组织内高表达的iNOS催化产生的NO促进了心肌细胞的凋亡和EAM病程进展,初期给予L-NAME治疗能通过抑制iNOS活性,减少NO生成,降低对心肌的损伤程度,作用机制可能与其抑制心肌细胞凋亡有关.

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作者: 丁国雷 [1] 韩丽娜 [1] 王玉堂 [1] 刘建伟 [2] 何爽 [1] 邹晓 [1]
期刊: 《中国应用生理学杂志》2013年29卷2期 119-123,后插4页 MEDLINEISTICPKUCSCD
分类号: R542.2
栏目名称: 研究论文
发布时间: 2016-11-07
基金项目:
北京市自然科学基金 北京市科技新星计划(B类) 第39批教育部留学回国人员科研启动基金
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