pGenesil-siHBV X对HepG2.2.15细胞HBV表达和复制的抑制效果研究
Suppressing effect of pGenesil-siHBV X on the expression and replication of hepatitis B virus in HepG2.2.15 cells
目的 研究针对HBV X基因区设计的小干扰RNA(siRNA)表达载体质粒pGenesil-siHBV X对HepG2.2.15细胞HBV表达和复制的抑制效果及特异性.方法 针对HBV X区设计siRNA表达载体质粒pGenesil-siHBV X.分别用培养液(空白对照)、脂质体Metafectene、pGenesil空载体、pGenesil-siHK(阴性对照)、pGenesil-siAFP(特异性对照)、pGenesil-siHBV X处理或转染HepG2.2.15细胞各3次.于每次转染后24 h,取各组细胞培养上清液,用时间分辨荧光免疫测定技术检测上清液中HBsAg和HBeAg含量,用化学发光法检测AFP含量,用PCR荧光定量技术检测HBV-DNA复制水平.结果 pGenesil-siHBV X转染能抑制HepG2.2.15细胞对HBV标志物的表达,且抑制作用随转染次数增加而增强.第3次转染后,pGenesil-siHBV X组细胞上清液中HBsAg、HBeAg和HBV-DNA检测结果分别为(6.26±1.07)ng/ml、(0.13±0.05)Ncu/ml和(3.01±0.40)×107拷贝/ml,与空白对照组的(22.50±1.39)ng/ml、(1.12±0.11)Ncu/ml和(12.33±1.28)×107拷贝/ml比较,差异有统计学意义(t值分别为12.80、12.21、9.71,P<0.05);pGenesil-siHBV X转染不影响细胞对AFP的表达(t=0.18,P=0.86).结论 pGenesil-siHBV X可以有效和特异地抑制HepG 2.2.15细胞HBV-DNA的复制及HBsAg和HBeAg表达.
更多- 浏览:148
- 被引:0
- 下载:20
相似文献
- 中文期刊
- 外文期刊
- 学位论文
- 会议论文