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人胚胎主动脉血管内皮祖细胞的分离、培养及鉴定

Isolation, culture and identification of endothelial progenitor cells from human fetal aorta

摘要:

目的 研究人胚胎血管内皮祖细胞(EPCs)分离、扩增及鉴定的方法,并评价其分化成血管内皮细胞的能力,为人胚胎血管来源 EPCs 作为干细胞技术治疗疾病的细胞材料提供依据.方法 从 14 周龄流产人胚胎主动脉中应用胶原酶消化法分离获得 EPCs,用含有碱性成纤维细胞生长因子、表皮生长因子和白血病抑制因子的低血清培养基体外扩增培养EPCs.分离培养的 EPCs 鉴定采用细胞免疫荧光染色、RT-PCR 及流式细胞术,检测 EPCs 细胞的特异标志CD133、CD34 和血管内皮细胞生长因子受体 2(VEGFR2).培养的 EPCs 应用 VEGF 进行诱导分化,并评价其分化成为血管内皮细胞的能力.结果 分离的人胚胎主动脉 EPCs 细胞表达 EPCs 的标志分子 CD133、CD34 和 VEGFR2.EPCs 在体外特定低血清培养条件下表现很强的增殖能力.培养的 EPCs 细胞经过VEGF 诱导后,细胞表达 CD133 明显降低,表达 vWF、CD31 和 ELAM-1 增强,并且体外成管能力和摄取Ac-LDL 能力增强,表明细胞分化成为血管内皮细胞.结论 人胚胎早期主动脉的 EPCs 具有很好的体外自我更新能力和分化成为血管内皮细胞的潜能,可作为 EPCs 治疗疾病的细胞材料.

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