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TaqMan-MGB荧光探针法检测北京地区幽门螺杆菌gyrA基因第87位密码子和第91位密码子耐药突变

Employment of TaqMan-MGB fluorescent probe real-time PCR for detection of the quinolones resistant mutations of Helicobacter pylori in Beijing area

摘要:

目的 采用TaqMan-MGB荧光探针法检测北京地区幽门螺杆菌喹诺酮类耐药位点gyrA基因第87位密码子和第91位密码子突变情况,比较与药敏试验和一代测序法的一致性.方法 收集北京大学第一医院消化内科门诊尿素酶试验阳性的患者252例,所有患者均使用MGB荧光探针法和一代测序法对喹诺酮类耐药位点gyrA基因第87位密码子和第91位密码子进行检测.其中158例患者同时进行药敏试验检测,同时分析耐药位点突变发生率与耐药表型的关系.结果 158例传统培养联合药敏法检测的标本中成功培养出85例,占53.8%,其中耐药型菌株40例,敏感型菌株42例.而MGB荧光探针法成功检出155例,占98.1%,其中野生型93例,突变型62例.在药敏试验检测出的85例阳性标本中,两种方法检出的符合率为94.1%.252例标本中,一代测序法成功检测出234例,占92.9%,其中野生型160例,突变型74例.在74例突变型标本中,含gyrA基因第87位密码子突变的标本占60.8%,含gyrA基因第91位密码子突变的标本占39.2%.MGB荧光探针法成功检测出250例,占99.2%,其中野生型161例,突变型89例.在89例突变组标本中,含gyrA基因第87位密码子突变的标本占64.0%,含gyrA基因第91位密码子突变的标本占36.0%.一代测序法和MGB荧光探针法在区分是否含有突变上的符合率为95.3%.结论 TaqMan-MGB荧光探针法可快速、敏感地检测患者胃黏膜标本中幽门螺杆菌喹诺酮类耐药位点gyrA基因第87位密码子和第91位密码子的突变情况,与药敏试验和一代测序法有较高的符合性.

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