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S腺苷蛋氨酸与氯喹联合应用对肝癌细胞急性缺血/缺氧过程中生物学特性的影响

The combined effects of S-adenosylmethionine and chloroquine on hepatocellular carcinoma during acute ischemic hypoxia

摘要:

目的 研究S腺苷蛋氨酸(SAMe)对急性缺血/缺氧过程中肝癌细胞HepG2生物学特性的作用,并通过应用氯喹(CQ)抑制自噬探讨其可能机制.方法 用实时PCR检测自噬特异性基因(Beclin 1)表达的变化.吖啶橙染色后,采用荧光显微镜对自噬进行定性观察.CCK8法检测HepG2细胞生存率.Western blot检测蛋白LC3的变化.用AnnexinV/PI流式细胞仪检测细胞凋亡的变化.结果 缺血/缺氧可以促进HepG2细胞生长,细胞生存率比空白对照组增加了20%~30%.SAMe可诱导HepG2细胞自噬的表达,自噬在荧光强度和Beclin 1基因水平分别比空白对照组增强约3.2倍和3.5倍.SAMe对HepG2细胞具有显著的抑制作用,这种抑制作用在缺血/缺氧环境中更加明显.经SAMe处理后,正常和缺血/缺氧环境的细胞生存率与空白对照组相比分别下降了30%和70%.与空白对照组相比,细胞经SAMe处理后,凋亡比例增加约24%.细胞经SAMe预处理,再进行缺血缺氧后,凋亡比例增加约40%.抑制自噬后,细胞生存率下降15%~30%,细胞凋亡增加7%~16%.结论 在SAMe抑制HepG2细胞生长过程中,自噬对细胞有一定的保护作用.

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