干扰素α抗病毒活性的实验研究
An experimental study on antiviral effects of IFN α
目的比较不同亚型干扰素α(IFN α2b、IFN α2a,IFN α1b)对JAK-信号转导活化转录因子(STAT)通道中重要信号传导分子STAT1、STAT2、干扰素α受体(IFNAR)、蛋白激酶(PKR)、核糖核酸酶L(RNase L)表达的影响,研究其抗病毒活性的差别,并评价IFN α抗病毒活性的关键性信号传导分子.方法 1000 U/ml的不同亚型IFN α分别作用于HepG2细胞后,用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测HepG2细胞内STAT1、STAT2、IFNAR、PKR、RNase L mRNA表达水平.用western blot方法检测细胞内STAT1及IFNAR蛋白表达水平.结果 RT-PCR的实验结果:(1)IFN α1b处理组IFNAR、STAT1、STAT2 mRNA的表达水平较IFN α2b组高,两组比较差异无统计学意义.IFN α1b、IFN α2b处理组IFNAR、STAT1、STAT2 mRNA水平明显较IFN α2a组高,差异均有统计学意义,F值分别为5.26、15.6、4.67,P值均<0.05.(2)IFN α1b、IFN αx2b、IFN α2a处理后的PKR表达水平相似,3组比较差异无统计学意义.(3)RNase L表达量极少,无法比较不同处理组间RNase L mRNA表达水平的差异性.Westernblot实验结果:(1)IFN α1b处理组IFNAR、STAT1蛋白水平较IFN α2b处理组高,两者比较差异无统计学意义,IFN α1b、IFN α2b处理组IFNAR、STAT1蛋白水平较IFN α2a处理组明显升高,差异有统计学意义,F值分别为17.7、20.1,P值均<0.05.结论 IFN α2b、IFN α2a、IFN α1b均可促进JAK-STAT信号通道中STAT1、STAT2、IFNAR mRNA及蛋白表达,IFN α1b和IFN α2b作用较强,IFN α2a作用较弱.初步表明,IFN α1b、IFN α2b的抗病毒活性较IFN α2a强,IFNAR、STAT1、STAT2可作为评价IFN α抗病毒活性的关键性指标,而PKR、RNase L能否作为评价指标有待进一步的实验证实.
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