换一批口腔癌相关成纤维细胞的分离培养及初步鉴定
Human oral carcinoma-associated fibroblasts:its cultivation, purification and identification
摘要目的对口腔癌相关成纤维细胞(CAFs)进行分离、培养、纯化并作初步鉴定.方法①用组织块培养法获得原代口腔CAFs和口腔黏膜正常成纤维细胞(NFs),0.25％胰蛋白酶消化传代,联合采用机械刮除法和酶消化法纯化细胞; ②通过形态学观察和多种蛋白的免疫组化染色,对口腔CAFs进行初步鉴定.结果 ①获得第3代纯化口腔CAFs;②口腔CAFs呈长梭形,胞质突减少,细胞大小不一致,生长密集,排列紊乱.电镜下可见肌丝和电子致密斑等超微结构;③口腔CAFs的细胞角蛋白免疫组化染色呈阴性,波形蛋白、α-平滑肌动蛋白、基质金属蛋白酶-2染色呈阳性.结论 CAFs与NFs相比,在形态结构、生长方式、蛋白表达等方面差异均有显著性,推测口腔肿瘤-宿主界面微环境可能是其重要的影响因素.
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