microRNA-330-3p调控口腔鳞癌细胞增殖和凋亡的实验研究
MicroRNA-330-3p regulates the cell proliferation and apoptosis of oral squamous cell carcinoma
目的:探讨微小RNA-330-3p(miR-330-3p)对口腔鳞癌细胞增殖和凋亡的调控作用。筛选并验证相关靶基因。方法实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测口腔鳞癌细胞系、口腔鳞癌组织与癌旁正常上皮组织中miR-330-3p的表达情况。应用miR-330-3p抑制物(miR-330-3p inhibitor)和miR-330-3p模拟物(miR-330-3p mimics),分别转染口腔鳞癌细胞系(HN13)细胞,实时荧光定量PCR检测miR-330-3p的转染效率;然后应用细胞增殖、细胞克隆形成以及流式细胞术等实验技术,分别检测miR-330-3p上调和下调对口腔鳞癌细胞增殖及凋亡的影响。通过生物信息网站miRanda和TargetScan与本课题组前期基因芯片数据比对预测了9个可能的靶基因,并进一步用相关实验验证miR-330-3p对靶基因的负向调控作用。结果与癌旁正常上皮组织相比,口腔鳞癌组织中miR-330-3p的表达显著上调,平均表达水平为癌旁正常组织的1.75倍(n=29,t=5.282,P=0.0045);miR-330-3p抑制物和miR-330-3p模拟物,能分别显著降低或升高HN13细胞中miR-330-3p的表达量;转染miR-330-3p抑制物组HN13细胞增殖能力明显降低、凋亡率升高;而miR-330-3p模拟物组细胞的增殖能力明显升高、凋亡率降低。 miR-330-3p能够结合PDCD4的3’UTR,负向调控PDCD4的表达。结论 miR-330-3p能够与PDCD4的3’UTR结合抑制PDCD4的转录后翻译作用,从而促进了口腔鳞癌细胞的生长;其抑制物能发挥有效的抗癌作用,研究结果为口腔鳞癌的靶向基因治疗提供候选分子。
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