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慢性乙型肝炎患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞的功能研究

The function of circulating CD4+CD25+ regulatory T cells in patients with chronic hepatitis B

摘要:

目的 测定慢性乙型肝炎(CHB)患者外周血CD4+C25+调节性T细胞(CD4+CD25+Treg细胞)的抗原诱导与抑制功能,初步探讨CD4+ CD25+ Treg细胞在HBV感染慢性化过程中的作用.方法 采集22例CHB患者、11例急性早期乙型肝炎患者(AHB)和20例健康对照者的外周血,分离外周血单核细胞(PBMC)后体外培养,并经重组HBsAg或抗人CD3单克隆抗体诱导,流式细胞仪分析诱导前后CD4+ CD25+Treg细胞比例的变化.免疫磁珠分选出CD4+ CD25+Treg细胞亚群和去除了CD4+ CD25+Treg细胞的效应细胞亚群(PBMC-Treg),在重组HBsAg刺激下进行体外单独培养或共培养,并检测效应细胞的增殖与细胞因子生成量的变化.所有患者均进行HBV血清标记物水平、血清HBV DNA载量和肝功能水平的测定.结果 在重组HBsAg刺激下,CHB组PBMC可诱导出较高比例的CD4+CD25+ Treg细胞,且与AHB组、健康对照组之间的差异有统计学意义(F值分别为3.47,4.98,P均<0.05).体外单独培养时,患者组及健康对照组的CD4+ CD25+ Treg细胞的增殖能力较弱,仅能产生微量的IFN-γ和IL-10,且组间差异无统计学意义(P>0.05).AHB组效应细胞的增殖能力和IFN-γ产量均明显高于CHB组,而IL-10的产量与CHB组均较低,组间比较差异无统计学意义(P>0.05).混合培养时,AHB组及CHB组的CD4+ CD25+Treg细胞均能显著抑制效应细胞的增殖及IFN-γ的产量(F值分别为4.66,5.24,P均<0.01).结论 CHB患者的外周血CD4+ CD25+ Treg细胞可被HBsAg特异性诱导,CD4+ CD25+ Treg细胞在体外可显著抑制效应细胞的增殖与IFN-γ的分泌,提不CD4+ CD25+Treg细胞可能通过抑制抗原特异性T细胞的应答而导致外周免疫耐受,并与HBV感染的慢性化密切相关.

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