大鼠脑皮质未成熟星形胶质细胞的分离、鉴定及原代培养
Isolation, identification and primary culture of immature astrocyte of rat brain cortex
目的 探讨大鼠脑皮质未成熟星形胶质细胞的分离、鉴定及原代培养技术.方法 采用差速贴壁法清除成纤维细胞及酶消化去除少突胶质细胞污染,应用免疫荧光进行细胞鉴定.取不同时间点的细胞在倒置显微镜下观察细胞形态变化,双重免疫荧光染色观察细胞生长过程的分化状态.结果细胞形态观察提示:6~14 d细胞呈均匀扁平多角状,16 d后部分细胞肥大增生,呈成熟状态.免疫组化染色显示:GFAP(+)细胞达97%.免疫荧光双重标记发现:16 d后细胞表达vimentin和 nestin 这两种蛋白减弱.结论 本实验技术可获得纯度高,形态和功能良好,表达稳定的大鼠脑皮质未成熟星形胶细胞.
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