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优化的多重扩增阻滞突变系统-PCR对载脂蛋白E基因的简易分型

Apolipoprotein E genotyping by multiplex amplification refractory mutation system PCR with optimized conditions

摘要:

目的 通过改进和优化多重扩增阻滞突变系统-PCR(multi-ARMS-PCR)条件,建立载脂蛋白E(ApoE)基因的简易分型方法.方法 基于multi-ARMS-PCR的原理和特点,针对文献报道方法中存在的缺陷和错误,重新设计或改进引物.以外周血白细胞基因组DNA为模板,应用4个等位基因特异性寡核酸上游引物、1个通用下游引物和一对内参引物,分A,B两个管同步进行多重PCR反应.PCR扩增产物经过琼脂糖凝胶电泳分离-EB染色,根据电泳带型的差异,实现对ApoE 6种基因型的判定.结果 新引物显著提高了扩增效率和反应特异性,排除了非特异条带的干扰,减少了ApoE基因分型的错判.结论 采用优化后的multi-ARMS-PCR方法对ApoE基因型进行鉴定,具有操作简便、时间短、效率高、成本低的优点,值得推广.

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作者: 刘静 [1] 刘建伟 [1] 叶玲 [1]
分类号: R394.33
栏目名称: 基础研究
DOI: 10.3969/j.issn.1671-5403.2011.02.023
发布时间: 2011-09-13
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