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自噬在右美托咪定减轻LPS致小鼠巨噬细胞炎症反应中的作用

Role of autophagy in dexmedetomidine-induced reduction of lipopolysaccharide-caused inflammatory responses in macrophages of mice

摘要:

目的 评价自噬在右美托咪定减轻LPS致小鼠巨噬细胞炎症反应中的作用.方法 体外培养的小鼠巨噬细胞系RAW264.7细胞,细胞常规接种于6孔板或96孔板,待融合度为60%时,采用随机数字表法分为4组(n=20):对照组(Con组)、LPS组、LPS+右美托咪定组(LPS+Dex组)和LPS+右美托咪定+自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)组(LPS+Dex+3-MA组).Con组加入PBS培养12 h;LPS组加入终浓度为1000 ng∕ml的LPS孵育12 h;LPS+Dex组先加入终浓度为1000 ng∕ml的LPS,随后立即加入终浓度为1μmol∕L的右美托咪定孵育12 h;LPS+Dex+3-MA组先加入终浓度为2 mmol∕L的3-MA孵育1 h,再加入终浓度为1000 ng∕ml的LPS,随后立即加入终浓度为1μmol∕L右美托咪定孵育12 h.采用CCK-8法检测细胞活力,采用ELISA法测定上清液NO、TNF-α和IL-1β的浓度,采用Western blot法测定微管相关蛋白轻链3Ⅰ(LC3Ⅰ)、LC3Ⅱ、泛素结合蛋白(P62)和Bcelin-1的表达水平,计算LC3Ⅱ∕LC3Ⅰ比值.结果 与Con组相比,LPS组巨噬细胞活力降低,TNF-α、IL-1β和NO的浓度升高,LC3Ⅱ∕LC3Ⅰ比值升高,P62和Beclin-1的表达上调(P<0.05);与LPS组相比,LPS+Dex组巨噬细胞活力升高,TNF-α、IL-1β和NO的浓度降低,LC3Ⅱ∕LC3Ⅰ比值升高,P62表达下调,Beclin-1表达上调(P<0.05);与LPS+Dex组相比,LPS+Dex+3-MA组巨噬细胞活力降低,TNF-α、IL-1β和NO的浓度升高,LC3Ⅱ∕LC3Ⅰ比值降低,P62表达上调,Beclin-1表达下调(P<0.05).结论 自噬增强参与了右美托咪定减轻LPS致小鼠巨噬细胞炎症反应.

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作者: 毛幸 [1] 闫梦莹 [1] 陈红光 [1] 冯竞成 [1] 王国林 [1] 谢克亮 [1] 于泳浩 [1]
期刊: 《中华麻醉学杂志》2018年38卷8期 992-995页 ISTICPKUCSCDCA
栏目名称: 重症医学
DOI: 10.3760/cma.j.issn.0254-1416.2018.08.025
发布时间: 2019-01-03
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