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NLRP3炎症小体在富氢液减轻LPS致小鼠巨噬细胞线粒体损伤中的作用

Role of NLRP3 inflammasome in hydrogen-rich saline-induced reduction of LPS-caused damage to mitochondria in macrophages of mice

摘要:

目的 探讨NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)炎症小体在富氢液减轻LPS致小鼠巨噬细胞线粒体损伤中的作用.方法 常规培养小鼠巨噬细胞株RAW264.7细胞,采用随机数字表法随机分为4组(n=6):对照组(C组)、LPS组、富氢液+LPS组(LPS+H2组)和富氢液+LPS+ATP组(LPS+ATP+H2组).LPS组给予浓度为1μg/ml的LPS孵育30 min.LPS+H2组和LPS+ATP+H2组同时给予浓度为1μg/ml的LPS和浓度为0.6 mmol/L的富氢液孵育30 min,然后LPS+ATP+H2组给予浓度为1 nmol/L的ATP孵育6h.采用JC-1法测定线粒体膜电位(MMP),采用Clark氧电极法测定线粒体呼吸控制率(RCR).采用Western blot法测定细胞NLRP3、caspase-1和凋亡相关点状蛋白(ASC)的表达.采用ELISA法检测上清液IL-1β、IL-18和IL-6的浓度.结果 与C组比较,LPS组MMP和RCR降低,上清液IL-1β、IL-18和IL-6浓度升高,细胞NLRP3、caspase-1和ASC表达上调(P<0.05);与LPS比较,LPS+H2组MMP和RCR升高,上清液IL-1β、IL-18和IL-6浓度降低,细胞NLRP3、caspase-1和ASC表达下调(P<0.05);与LPS+H2组比较,LPS+ ATP+H2组MMP和RCR升高,上清液IL-1β、IL-18和IL-6浓度降低,细胞NLRP3、caspase-1和ASC表达下调(P<0.05).结论 富氢液可通过抑制NLRP3炎症小体激活,减轻LPS致小鼠巨噬细胞线粒体损伤.

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