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右美托咪定对内毒素致小鼠巨噬细胞凋亡时HIF-1α表达的影响

Effect of dexmedetomidine on expression of hypoxia-inducible factor-1α during endotoxin-caused apoptosis in macrophages of mice

摘要:

目的 评价右美托咪定对内毒素致小鼠巨噬细胞凋亡时缺氧诱导因子-1 (HIF-1α)表达的影响.方法 体外培养小鼠巨噬细胞系RAW264.7细胞,将细胞接种于6孔板或96孔板,待融合度为60%~ 70%时,采用随机数字表法分为4组(n=16):对照组(Con组)、右美托咪定组(Dex组)、脂多糖组(LPS组)和LPS+右美托咪定组(LPS+Dex组).Con组加入PBS缓冲液;Dex组加入1μmol/L右美托咪定;LPS组和LPS+Dex组均给予1μg/ml的LPS;LPS+Dex组于加入LPS后立即给予1μmol/L右美托咪定,各组孵育24 h.采用TUNEL法测定细胞凋亡率,采用JC-1法测定线粒体膜电位水平,采用荧光酶标仪法测定ROS含量,采用酶标仪法测定ATP含量,采用Western blot法测定HIF-1α、细胞色素c(Cyt c)、caspase-9和cleaved caspase-3的表达水平.结果 与Con组相比,LPS组巨噬细胞凋亡率和ROS含量升高,ATP含量和线粒体膜电位水平降低,HIF-1α、Cyt c、caspase-9和cleaved caspase-3表达上调(P<0.05),Dex组上述指标差异无统计学意义(P>0.05);与LPS组相比,LPS+Dex组巨噬细胞凋亡率和ROS含量降低,ATP含量和线粒体膜电位水平升高,HIF-1α表达上调,Cyt c、caspase-9和cleaved caspase-3表达下调(P<0.05).结论 右美托咪定可减轻内毒素致巨噬细胞氧化应激损伤,改善线粒体功能,抑制线粒体途径凋亡,其机制可能与上调HIF-1α表达有关.

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