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自噬在氢减轻LPS致小鼠巨噬细胞线粒体损伤中的作用

Role of mitophagy in hydrogen-induced reduction of LPS-caused mitochondrial injury to macrophages of mice

摘要:

目的 评价自噬在氢减轻LPS致小鼠巨噬细胞线粒体损伤中的作用.方法 常规培养小鼠RAW264.7细胞,采用随机数字表法分为4组(n=6):对照组(Con组)、LPS组、LPS+氢组(LPS+H2组)和LPS+氢+自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)组(LPS+H2 +3-MA组).LPS组给予终浓度为1 μg/ml的LPS孵育6 h;LPS+H2组给予终浓度为1μg/ml的LPS和浓度为0.6 mmol/L的含氢培养液孵育6 h;LPS+H2+3-MA组先给予终浓度为2 mmol/L的3-MA孵育1h,然后给予终浓度为1μg/ml的LPS和浓度为0.6 mmol/L的含氢培养液孵育6h.采用Clark氧电极法测定线粒体呼吸控制率(RCR),采用JC-1法测定线粒体膜电位(MMP),透射电镜下计数自噬体,采用Western blot法测定细胞PTEN诱导的蛋白激酶1(PINK1)、E3泛素连接酶(Parkin)、微管相关蛋白1轻链3Ⅱ(LC3Ⅱ)和Beclin-1的表达.结果 与Con组比较,LPS组RCR和MMP降低,PINK1、Parkin、LC3Ⅱ和Beclin-1表达上调,自噬体计数升高(P<0.05);与LPS组比较,LPS+H2组RCR和MMP升高,PINK1、Parkin、LC3Ⅱ和Beclin-1表达上调,自噬体计数升高(P<0.05);与LPS+H2组比较,LPS+H2 +3-MA组RCR和MMP降低,PINK1、Parkin、LC3Ⅱ和Beclin-1表达下调,自噬体计数降低(P<0.05).结论 自噬增强参与了氢减轻LPS致小鼠巨噬细胞线粒体损伤.

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作者: 陈红光 [1] 毛幸 [1] 张鹏 [2] 田婧 [1] 王桂平 [2] 白广 [2] 谢克亮 [1] 于泳浩 [1]
作者单位: 天津医科大学总医院麻醉科 天津市麻醉学研究所 300052 [1] 天津海滨人民医院麻醉科 300280 [2]
期刊: 《中华麻醉学杂志》2019年39卷1期 89-92页 ISTICPKUCSCDCA
栏目名称: 重症医学
DOI: 10.3760/cma.j.issn.0254-1416.2019.01.023
发布时间: 2019-06-12
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