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RNA干扰对乳腺癌细胞骨桥蛋白基因表达抑制的研究

Study of knocking down osteopontin expression by specific siRNA in human breast carcinoma cells

摘要:

目的 应用RNA干扰术靶向降低乳腺癌MCF-7细胞中骨桥蛋白基因(OPN)的表达水平,研究OPN基因对乳腺癌细胞增殖和侵袭性等生物学行为的影响.方法 将设计合成的骨桥蛋白OPN序列特异性小分子干扰RNA(siRNA),转染乳腺癌细胞株MCF-7,用逆转录PCR和蛋白印记杂交测OPN mRNA及蛋白水平的表达,通过生长曲线、克隆形成实验来检测细胞增殖及侵袭性情况的变化.结果 OPN 特异性siRNA转染后,骨桥蛋白mRNA及蛋白水平均明显下降,比色法显示转染组72 h吸光度值为(0.21±0.06)与空白对照组(1.18 ±0.05)相比较明显受到抑制.转染组细胞克隆形成数为3.8个,较空白对照组(7.3个)及阴性对照组(7.1个)明显下降(P<0.05).结论 乳腺癌MCF-7细胞中,针对OPN合成的siRNA能够有效地抑制骨桥蛋白的表达,从而显著抑制细胞的增殖和侵袭能力.

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