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Sry基因监测腺病毒介导肝细胞生长因子修饰的骨髓间充质干细胞移植在大鼠烫伤创面愈合中的作用

Study on evaluating Sry as an engrafting track of bone mesenchymal stem cells modified with adenoviral vector expressing human hepatocyte growth factor for healing of burn wounds

摘要:

目的 制备地高辛标记的Sry探针,监测局部异体移植携带人肝细胞生长因子基因的重组腺病毒(Ad-HGF)修饰的骨髓间充质干细胞(BMSCs)在烫伤创面愈合中的作用.方法 用雄性大鼠肝组织通过聚合酶链反应法克隆Sry基因,并将其构建至T Easy Vector上,用地高辛标记法制备Sry基因原位杂交探针.密度梯度离心法体外分离培养雄性Wistar大鼠BMSCs,并转染Ad-HGF.复制16只背部深Ⅱ度烫伤雌性大鼠模型,于造模成功后,将Ad-HGF修饰的BMSCs一次性多点注射于创面真皮下.21 d后,处死大鼠,取愈合创面新生组织和正常组织制作石蜡切片,原位杂交法检测组织切片中Sry基因的表达.结果 ①从8只雄性大鼠中成功克隆出Sry基因;②制备出地高辛标记的Sry探针;③16只雌性大鼠深Ⅱ度烧伤模型复制成功,用Ad-HGF修饰的BMSCs治疗后,原位杂交法证实全部雌鼠创面新生组织中有Sry表达,而正常组织中未检测到.结论 外源移植的BMSCs参与了大鼠烫伤创面的修复,Sry基因可作为细胞追踪标记,为细胞治疗追踪技术及利用BMSCs治疗创伤的研究提供依据.

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