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腺病毒驱动KDR启动子介导CD/TK融合基因系统对血管内皮细胞的靶向杀伤作用

Adenovirus mediated fusion gene system driven by KDR promoter kills selectively vein endothelial cells

摘要:

目的探讨腺病毒介导KDR启动子驱动的融合基因体系,对人脐血管内皮细胞ECV304的选择性杀伤作用.方法将质粒pAdEasy-KDR-CDglyTK在293细胞内包装、扩增后,体外感染表达KDR的ECV304细胞株和不表达KDR的LS174T细胞株,并给予不同浓度的前药5-氟胞嘧啶(5-fuorocytosine,5-FC )和/或丙氧鸟苷(ganciclovir,G CV),观察该体系对不同细胞株的杀伤效应及其旁观者效应;并以流式细胞仪检测细胞周期的变化,电镜观察细胞的病变.结果所得病毒对两种细胞细胞的感染率相似,其感染率随腺病毒滴度的递增而增加;表达KDR的E CV304细胞对前药的具有较高的敏感性,不表达KDR的LS174T细胞对前药不敏感(P均<0 .01);融合基因的疗效优于任一单自杀基因(P均<0.01);且观察到该体系明显的旁观者效应.流式细胞术检测治疗后ECV304细胞G1期比率增多及S期细胞减少(P均<0 .01),同时,电镜下可见ECV304有凋亡和坏死改变.结论 KDR基因启动子可调控融合基因体系选择性杀伤人血管内皮细胞.

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作者: 苏国强 [1] 黄宗海 [1] 俞金龙 [1] 厉周 [1] 范应方 [1] 宋慧娟 [1] 张进华 [2]
期刊: 《中华普通外科杂志》2005年20卷3期 190-193页 ISTICPKUCSCD
分类号: R3
栏目名称: 论著
DOI: 10.3760/j.issn:1007-631X.2005.03.019
发布时间: 2005-04-21
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