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ERβ1基因及其剪切变异体真核表达载体的构建与鉴定

Construction and identification of eukaryotic expression plasmid of human estrogen receptorβ1 and its variant

摘要:

目的应用基因克隆技术构建雌激素受体β1(ERβ1)及其5-8外显子缺失变异体ERβ△5-8(文中简称ERβ△),为ERβ功能的研究奠定基础。方法组织中提取总RNA,RT-PCR法扩增基因ERβ1及ERβ△,限制性酶切并克隆于以带EGFP绿色荧光基因及Myc报告基因的非融合真核细胞表达质粒IRES2-EGFP,菌群转化扩增后琼脂糖凝胶电泳,限制性酶切后行DNA测序鉴定。结果 PCR扩增及限制性酶切法证实重组真核表达质粒的构建成功。测序表明ERβ1长度为1593 bp,ERβ△长度为972 bp,与GeneBank上公布的蛋白编码区序列一致。结论成功构建ERβ1基因及其剪切变异体ERβ△真核表达载体。

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作者: 陈迪 [1] 章乐虹 [2] 彭伟强 [1]
栏目名称: 论著
DOI: 10.3877/cma.j.issn.1674-0793.2013.04.006
发布时间: 2013-09-27
基金项目:
广东省科技计划项目
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