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维甲酸和音猬因子促进骨髓基质细胞向运动神经元发育的实验研究

Retinoic acid and sonic hedgehog induce bone marrow stromal cells to differentiate toward motor neurons

摘要:

目的研究维甲酸(RA)和音猬因子(Shh)单独和联合作用对促进骨髓基质细胞(BMSCs)向运动神经元(MN)发育的作用.方法采用密度梯度离心法结合贴壁法原代培养BMSCs,应用神经干细胞培养基(专利号ZL02134314.4)培养细胞并分四组:(1)空白对照组;(2)RA组,加入0.5μ∥mLRA;(3)Shh组,加入200ng/mL Shh因子;(4)RA+Shh组,加入0.5μg/mL RA和200ng/mL Shh.细胞培养后第8、12、16、20天,采用SABC免疫细胞化学和间接免疫荧光法分别检测神经干细胞标记nestin和运动神经元标记Hb9的表达,选细胞密度适中视野计算阳性细胞数,对比各组细胞阳性表达比例.结果RA组nestin阳性表达率比其他三组都高(P<0.05);Shh组和空白组阳性率均很低,两者间无显著差别;RA+Shh组和空白组比较有差别(P<0.05).四组中只有RA+Shh组Hb9表达阳性,其他组均未检测到Hb9抗体.结论RA能显著促进BMSCs增殖并向骨髓基质源性神经干细胞(BMSC-D-NSCs)分化,然而单独使用Shh并没有明显效果.在RA+Shh组,部分BMSC-D-NSCs在Shh诱导下表达了MN发育过程中的重要蛋白Hb9,提示BMSCs存在向MN发育的潜力,RA+Shh可以促进该分化过程.

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作者: 邓镇 [1] 姜晓丹 [1] 徐如祥 [1] 蔡颖谦 [1] 邹雨汐 [1] 杜谋选 [1]
期刊: 《中华神经医学杂志》2006年5卷6期 541-545页 ISTICPKUCSCDCA
分类号: Q254
栏目名称: 基础研究
DOI: 10.3760/cma.j.issn.1671-8925.2006.06.001
发布时间: 2006-07-17
  • 浏览:91
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