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体外培养骨髓源性神经干细胞死亡情况的观察

Death 0f bone marrow stromal cells-derived neural stem cells cultured in vitro

摘要:

目的 动态观察体外培养不同时间段骨髓源性神经干细胞(BMSCs-d-NSCs)的死亡情况,了解其体外培养条件下衰退和死亡的机制与规律.方法 密度梯度离心法分离培养大鼠骨髓基质细胞,以神经干细胞专用培养基促使其向神经干细胞分化,用AO染色、Rhodamine 123染色、TUNEL法及Annexin V-EGFP/PI双染在荧光显微镜下直接观察,并以流式细胞仪检测不同培养阶段细胞凋亡和坏死情况.结果 多种检测方法证实,BMSCs-d-NSCs在体外培养条件下1周、2周、3周、4周、8周均会出现不同程度的以凋亡为主的衰退和死亡现象,培养4周以上细胞凋亡和坏死情况较3周内明显增多.结论 体外培养BMSCs-d-NSCs的衰退和死亡有凋亡和坏死两种机制的共同参与,并以凋亡为主.

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