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烟碱型乙酰胆碱受体在离体海马小胶质细胞上的表达与定位

Expression and localization of α7-nicotinic acetylcholine receptors on rat hippocampal microglial cells

摘要:

目的 探讨烟碱型乙酰胆碱受体(α7-nAChR)在体外培养海马小胶质细胞上的表达和定位.方法 取新生SD大鼠的海马组织,进行胶质细胞的混合培养,然后分离纯化小胶质细胞,采用免疫荧光染色检测CD11b/c进行小胶质细胞的鉴定;采用RT-PCR和免疫荧光双标分别检测α7-nAChR在小胶质细胞中的表达和定位.结果 免疫荧光染色显示分离纯化的细胞表达小胶质细胞特异性抗体CD11b/c;RT-PCR能扩增出长度为450 bp的α7-nAChR目的 条带,免疫荧光双标检测显示小胶质细胞CD11b/c和α7-nAChR染色阳性,分别呈红色和绿色荧光,叠加后呈棕黄色,且细胞膜荧光信号较强.结论 α7-nAChR在体外培养的海马小胶质细胞中能正常表达,定位在细胞膜的功能性α7-nAChR较丰富.

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