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兔移植静脉重塑过程中凋亡及增殖的时间特性

Time characteristics of apoptosis and proliferate in rabbit remodeling process of vein grafting

摘要:

目的 观察移植静脉重塑过程中凋亡水平及增殖的时间特性.方法 将42只健康纯种新西兰大耳白兔分为7组,建立兔颈外静脉颈总动脉旁路移植术模型,分别于术前、术后第1、3、7、14、28及90天将移植静脉取出,并对其进行狭窄程度、增殖细胞核抗原(PCNA)蛋白水平、凋亡及透射电镜等相关检测.结果 (1)内膜厚度:正常对照组为(4.6±0.8)μm,术后1d组为(1.5±0.3) μm,较正常对照组显著降低,差异有统计学意义(t=8.778,P=0.000),术后3d组为(4.6±0.7) μm,与正常对照组比较差异无统计学意义(t=0.027,P=0.979),术后7d组为(19.0±2.8) μm(t=-12.114,P=0.000),术后14 d组为(36.2±5.8)μm(t=-13.229,P=0.000),术后28 d组为(67.2 ±4.6)μm(t=-32.842,P=0.000),术后90 d组为(95.0±6.8) μm(t=-32.322,P =0.000),均高于正常静脉组,差异有统计学意义;中膜+外膜厚度:正常静脉组为(6.6±0.8)μm,术后1d组为(8.8±1.2)μm(t=-3.737,P=0.005),术后3d组为(16.2±2.1) μm(t=-10.471,P =0.000),术后7d组为(46.2±6.1)μm(t=-15.755,P=0.000),术后14 d组为(64.0±6.1) μm(t=-22.871,P=0.000),术后28 d组为(126.1 ±6.4)μm(t=-45.409,P=0.000),术后90 d组为(132.4±11.0) μm(t=-27.951,P=0.000),均高于正常对照组,差异有统计学意义;(2)Western blot:PCNA相对表达量在正常对照组为(42.2±2.6)%,术后1d组为(33.4±3.7)%,低于正常对照组,差异有统计学意义(t =4.770,P=0.000),术后3d组为(46.3±3.8)%,高于正常对照组,差异有统计学意义(t =8.778,P=0.000),术后7d组达峰值为(79.7±8.3)%,显著高于正常对照组、术后1d组、术后3d组,差异有统计学意义(t=-10.564,P=0.000),之后缓慢下降,至术后第14天组为(72.8±3.1)%(t=-18.537,P=0.000),术后28 d组为(60.6±5.4)%(t=-7.527,P =0.000),术后90 d组为(48.0±3.8)%(t=-3.083,P=0.013),均高于正常对照组,差异有统计学意义;(3)免疫组织化学检测:PCNA阳性细胞百分比在正常对照组为(6.25±0.90)%,术后1d组为(4.96 ±0.70)%,较正常对照组略有下降,差异有统计学意义(t=2.755,P=0.021),术后3d组为(11.57±1.50)%(t=-7.458,P=0.000),术后7d组为(32.70 ±3.10)%(t=-20.101,P=0.000),与对照组比较差异均有统计学意义;自术后14d组始出现下降趋势;(4)原位缺口末端标记法(TUNEL):凋亡水平在正常对照组为(1.36±0.20)%,术后1d组细胞凋亡量骤增为(18.61±1.50)%(t=-27.873,P=0.000),与正常对照组比较差异有统计学意义;术后第3天组细胞凋亡水平下降为(7.16±0.50)%(t=-26.251,P=0.000),术后第7天组细胞凋亡水平为(1.98±0.40)%(t=-3.402,P=0.011),随后凋亡维持在较低水平,术后第14天组、术后第28天组及术后第90天组细胞凋亡水平分别为(4.37±0.70)%(t=-10.122,P=0.000)、(6.18±0.90)%(t=-12.839,P=0.000)以及(6.56±1.20)%(t=-10.497,P=0.000),上述各组与正常对照组比较,差异均有统计学意义.结论 静脉移植术后1d至术后3d,凋亡水平较高;术后7d增殖水平较高.

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