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转染IL-6基因骨髓基质细胞系对骨髓移植后免疫功能重建的促进作用

Accelerated immune reconstitution after bone marrow transplantation in mice by bone marrow stromal cell line transfected with IL-6 gene

摘要:

目的探讨转染IL-6基因的骨髓基质细胞系对同基因骨髓移植(BMT)后小鼠免疫功能重建的促进作用. 方法将IL-6 cDNA片段连接到pcDNA3真核表达载体上.用脂质体将pcDNA3IL-6转入骨髓基质细胞系QXMSC1,ELISA法测定转染IL-6基因骨髓基质细胞QXMSC1IL-6培养上清中IL-6的含量,有限稀释挑选多个细胞克隆,选择表达量最高的转基因细胞系QXMSC1IL-6用于动物实验.BABL/c小鼠经γ射线致死量照射后,输入同基因骨髓细胞(107/只)同时输入骨髓基质细胞QXMSC1IL-6(5×105/只).在骨髓移植后30 d、60 d检测BMT小鼠淋巴细胞对LPS,ConA增殖反应,T辅助细胞前体(help T lymphocyte precursor,HTLp),杀伤性T细胞前体(cytotoxic T lymphocyte precursor,CTLp),迟发型超敏反应(delayed-type hypersensitivity,DTH)及空斑形成细胞数(plaque forming cell,PFC),反映骨髓移植后小鼠免疫功能. 结果成功构建pcDNA3IL-6重组体.该细胞体外培养24 h分泌IL-6的含量为11.15(±2.41)μg/106.QXMSC1IL-6细胞系能明显增强BMT后淋巴细胞对LPS、ConA反应性,小鼠对异基因小鼠脾细胞DTH反应增强,脾脏中HTLp,CTLp及PFC数明显增加.转入外源IL-6 cDNA基因的骨髓基质细胞系QXMSC1IL-6在体内能明显促进BMT后小鼠T、B 淋巴细胞功能的恢复. 结论骨髓基质细胞系QXMSC1作为有效的外源基因靶细胞可促进骨髓移植后小鼠免疫重建.

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