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微小核糖核酸-21对过氧化氢诱导C-kit+心脏干细胞凋亡的作用及机制

Effect and related mechanism of miRNA-21 on hydrogen peroxide-induced C-kit + cardiac stem cells apoptosis

摘要:

目的 探讨微小核糖核酸-21(miRNA-21)对过氧化氢(H2O2)诱导的C-kit+心脏干细胞凋亡的作用及其机制.方法 采用酶消化法结合免疫磁珠分选法培养C-kit+心脏干细胞,然后将C-kit+心脏干细胞分为对照组(将miRNA-21模拟物阴性对照转染至C-kit+心脏干细胞48 h)、模拟物组(将miRNA-21模拟物转染至C-kit+心脏干细胞48 h)、对照+H2O2组(将miRNA-21模拟物阴性对照转染至C-kit+心脏干细胞48 h后,以100 μmol H2O2处理2h)和模拟物+H2O2组(将miRNA-21模拟物转染至C-kit+心脏干细胞48 h后,以100 μmol H2O2处理2h).采用RT-PCR检测各组miRNA-21的mRNA表达水平;采用流式细胞仪检测各组细胞凋亡情况;采用Western blot检测各组促凋亡相关蛋白(Caspase-3和Bax)和抗凋亡蛋白(Bcl-2)的蛋白表达水平.结果 (1)模拟物组的miRNA-21 mRNA表达水平高于对照组(P<0.05);对照+H2O2组的miRNA-21 mRNA表达水平低于对照组(P<0.05);模拟物+ H2O2组的miRNA-21表达水平低于模拟物组,而高于对照+H2O2组(P均<0.05).(2)对照组与模拟物组的细胞早期凋亡率差异无统计学意义[(4.57±3.45)%比(5.13±3.21)%,P> 0.05];对照+H2O2组细胞早期凋亡率高于对照组[(79.07±5.75)%比(4.57±3.45)%,P<0.05];模拟物+H2O2组细胞早期凋亡率高于模拟物组[(30.27±1.36)%比(5.13±3.21)%,P<0.05],而低于对照+H2O2组[(30.27±1.36)%比(79.07±5.75)%,P<0.05].(3)对照组与模拟物组的Caspase-3、Bax和Bcl-2的蛋白表达水平差异均无统计学意义(P均>0.05);对照+H2O2组Caspase-3和Bax的蛋白表达水平均高于对照组(P均<0.05),两组之间的Bcl-2蛋白表达水平差异无统计学意义(P>0.05);模拟物+H2O2组的Caspase-3和Bax蛋白表达水平均低于对照+ H2O2组(P均<0.05),而Bcl-2的蛋白表达水平高于对照+H2O2组(P<0.05).结论 过表达miRNA-21可通过降低细胞内促凋亡相关蛋白表达和提高抗凋亡蛋白表达,减轻氧化应激所致C-kit+心脏干细胞凋亡.

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作者: 赵然尊 [1] 王艳 [1] 邓文文 [1] 石蓓 [1] 龙仙萍 [1] 王正龙 [1] 陈文明 [1]
期刊: 《中华心血管病杂志》2017年45卷11期 971-977页 MEDLINEISTICPKUCSCDCABP
栏目名称: 基础研究
DOI: 10.3760/cma.j.issn.0253-3758.2017.11.014
发布时间: 2017-12-22
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