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糖尿病视网膜病变患者血浆miR-1470表达变化及可能机制探讨

Changes of plasma miR-1470 expression in patients with diabetic retinopathy and its possible mechanism

摘要:

目的 观察探讨糖尿病视网膜病变(DR)患者血浆中miR-1470的表达变化及可能机制.方法 住院治疗的30例DR患者(DR组)以及在眼科门诊检查的30例糖尿病患者(DM组)、30名正常健康者(正常组)纳入研究.抽取三组受检者静脉血5 ml,提取血浆总RNA,纯化.通过基因芯片筛选出在DR患者血浆中具有差异表达的miRNA,并采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)验证基因芯片检测结果.采用生物信息学预测miRNA调控的潜在靶基因,筛选出miR-1470及其靶基因表皮生长因子受体(EGFR).将人视网膜内皮细胞(hREC)分为正常组(糖浓度5.5 mmol/L)、高糖组(糖浓度25.0 mmol/L).将hREC转染miR-1470模拟物建立miR-1470高表达细胞模型,并将其分为空白对照组、高表达组、阴性对照组.采用RT-PCR检测细胞中miR-1470表达;采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测细胞中EGFR蛋白表达.两组间计量资料比较采用独立样本t检验,多组间计量资料比较采用方差分析,组间计量资料两两比较采用多重比较.结果 RT-PCR验证结果与基因芯片检测结果相符.DR组、DM组及正常组受检者血浆中miR-1470表达比较,差异有统计学意义(F=63.486,P=0.049).与DM组和正常组比较,DR且患者血浆中miR-1470表达明显减弱,差异有统计学意义(q=111.2、73.9,P<0.05).高糖组hREC中miR-1470表达明显低于正常组,差异有统计学意义(t=42.082,P=0.015).高糖组hREC中EGFR蛋白表达明显高于正常组,差异有统计学意义(t=-39.939,P=0.016).空白对照组、阴性对照组、高表达组hREC中miR-1470表达(F=637.069,P=0.000)、EGFR蛋白表达比较,差异有统计学意义(F=122.908,P=0.000).与空白对照组、阴性对照组比较,高表达组hREC中miR-1470表达明显升高(q=329.7、328.8,P<0.05),EGFR蛋白表达明显降低(q=242.5、234.6,P<0.05),差异均有统计学意义.阴性对照组与空白对照组hREC中miR-1470表达、EGFR蛋白表达比较,差异无统计学意义(q=1.5、7.9,P>0.05).结论 DR患者血浆中miR-1470表达明显下调,EGFR表达增加可能与其有关.

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作者: 殷晓雯 [1] 邵珺 [1] 邹健 [1] 谢田华 [1] 姚勇 [1]
期刊: 《中华眼底病杂志》2018年34卷4期 348-351页 ISTICPKUCSCDCA
分类号: R774.1
栏目名称: 糖尿病视网膜病变研究
DOI: 10.3760/cma.j.issn.1005-1015.2018.04.008
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